分子生物学实验理论与操作教程

目    录
前   言-----------------------------------------------------------I
第一部分   核酸提取----------------------------------------------1
实验一：基因组DNA提取--------------------------------------------1
实验二：总RNA提取------------------------------------------------3
第二部分   亚克隆技术---------------------------------------------8
实验三：质粒DNA提取----------------------------------------------8
实验四：DNA片段的酶切--------------------------------------------9
实验五：DNA片段的酶修饰-脱磷-------------------------------------12
实验六：DNA片段的连接--------------------------------------------13
实验七： DNA片段的回收-------------------------------------------15
第三部分   PCR技术-----------------------------------------------18
实验八：PCR产物的克隆技术----------------------------------------18
   八．1：T-载体构建 ---------------------------------------------19
   八．2：PCR产物的T-载体克隆------------------------------------20
   八．3：PCR产物的平端克隆技术----------------------------------21

实验九：RT-PCR技术-----------------------------------------------21
实验十：定量PCR -------------------------------------------------25
第四部分   文库构建技术------------------------------------------29
实验十一：mRNA的提取及纯化 --------------------------------------29
实验十二：cDNA文库构建技术- cDNA 链的反转合成--------------------32

实验十三：1,cDNA文库构建技术- cDNA 链的连接、包装及转染----------34
实验十三：2,RACE技术---------------------------------------------36
第五部分  核酸杂交技术-------------------------------------------40
实验十四：DNA探针的标记------------------------------------------40
实验十五：Southern杂交技术---------------------------------------44
第六部分：基因及基因产物检测技术----------------------------------48
实验十六：DNA的测序技术------------------------------------------48
实验十七：基因表达 1，基因的体外快速翻译-------------------------53
                   2，基因的诱导表达-----------------------------54
实验十八：报告基因的应用------------------------------------------57
实验十九：Western杂交技术----------------------------------------58
第七部分  基因表达轮廓技术---------------------------------------67
实验二十：DD-PCR技术---------------------------------------------73
实验二一：SSH技术------------------------------------------------74
第八部分：遗传转化技术-------------------------------------------75
实验二二：感受态细胞制备-----------------------------------------75
实验二三：重组基因的转化及筛选------------------------------------77
实验二四：原生质体分离--------------------------------------------78
实验二五：农杆菌转化技术------------------------------------------79
第九部分：分子标记技术--------------------------------------------80
实验二六：RFLP技术-----------------------------------------------86
实验二七：RAPD技术-----------------------------------------------86
实验二八：AFLP技术-----------------------------------------------87
实验二九：SSR技术------------------------------------------------89
第十部分：细胞技术-----------------------------------------------89
实验三十：细胞凋亡------------------------------------------------89
十一：附录  一----------------------------------------------------92
           二-----------------------------------------------------96